细胞生命的终结有许多种方式，凋亡只是其中一种，所以要确保自己检测到的的确是凋亡信号。上海东寰为您分析细胞凋亡的检测方法！

细胞凋亡的检测方法也有多种，如形态学检测、磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V 法）、线粒体膜势能检测、DN***断化检测、TUNEL 法及 Caspase-3 活性检测等，可根据自己的实验需求选择合适的方法。这里我们主要了解 Annexin V 法。

Annexin V 是一种分子量为 35～36 KD 的丰富的胞内蛋白。Annexin V 属于 Ca2+ 结合蛋白家族，可与磷脂（PL）发生可逆的 Ca2+ 依赖性结合，对磷脂酰丝氨酸（PS）具有高亲和力。在健康细胞中，PS 主要位于质膜的胞质侧，而在早期凋亡细胞中，PS 从质膜内侧翻转至外侧，Annexin V 与暴露在细胞外环境的 PS 结合。

核酸染料碘化丙啶（PI）及 7 氨基-放线菌素 D（7-AAD）均具有高 DNA 结合常数，它们不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整细胞膜，但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染色。因此，将 Annexin V 与 PI 或 7-AAD 联合使用，可以将凋亡早、晚期的细胞以及死细胞区分开来。

Annexin V 可以与荧光素（FITC、PE）或 biotin 缀合，这种形式保留了 Annexin V 对 PS 的高亲和力，因此可以用流式细胞术或荧光显微镜检测细胞凋亡的发生。与 PI 不同，7-AAD 与 PE 和 FITC 的光谱重叠更小，因此，可以在多色分析中与 PE 和 FITC 标记的抗体联合使用。

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