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细胞凋亡的晚期检测
  上期我们主要讲解了细胞凋亡的早期检测方法,这期主要讲解一下细胞凋亡晚期中,核酸内切酶(某些Caspase的底物)在核小体之间剪切核DNA,产生大量长度在180-200 bp 的DNA的片段。

  1、凋亡 DNA Ladder 检测试剂盒 
       
  细胞经处理后,采用常规方法分离提纯DNA,进行琼脂糖凝胶和溴化乙啶染色,在凋亡细胞群中可观察到典型的DNA ladder。Quick Apoptotic DNA Ladder Detection Kit可以快速(约1-2小时)、灵敏地检测凋亡细胞中的DNA的片段。

  2、TUNEL-based DNA 的片段分析试剂盒 

  细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测。Apo-BrdUTM分析使用2种颜色的TUNEL方法用流式细胞仪检测凋亡细胞中DNA条带。采用的BrdU比生物素标记的或地高辛(digoxigenylated)标记的方法灵敏度更高。

  3、Caspase分析试剂和试剂盒  

  Caspase在细胞凋亡中发挥着重要的作用,属于天冬氨酸蛋白酶。其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。在正常状态下,caspase家族都以无活性的酶原(30~50kD)形式表达,Caspase酶原由原结构域、大亚基(~20kD)和小亚基(~10kD )构成。当细胞发生凋亡时caspase可以被蛋白酶裂解,大亚基和小亚基形成活化的caspase。一些caspase活化后可以次序激其他caspase形成caspase级联反应,促发细胞凋亡。 

  以上就是细胞凋亡晚期的一些检测,希望上海东寰分享的内容能对大家有所帮助,想要了解更多,欢迎致电咨询。
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