兔骨骼肌细胞原代分离培养

【简介】

骨骼肌的一般形态特征肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方，肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维；

【材料】

细胞培养板、培养皿、10%FBS的DMEM培养基、PBS缓冲液；

【方法】

1）兔处死，取胸大肌约1cm³,并将其剪成1mm³大小的肌小粒。

2）反复用缓冲液洗去血细胞,将肌小粒小心贴附于细胞培养皿，将皿底向上轻置于37℃、5%CO₂的培养箱中；

3）2~4h后轻轻翻转培养皿,补足培液使肌小粒浸浴于培养液中，3d换液一次,待细胞长满即可传代；

【培养】

DMEM培养基（10%FBS）

【鉴定】

1）免疫荧光：

2）阳性：肌蛋白（a-Actin）、结蛋白（Desmin）；