豚鼠食管上皮细胞分离培养及鉴定

【简介】

【材料】

成年豚鼠、手术剪、手术镊、75%酒精、双抗、FBS、培养皿、15ml离心管、DMEM、PBS、D-Hanks、胰酶；

【方法】

1）处死豚鼠，取食管组织，去除肌肉层，PBS清洗；

2），将上皮层组织剪成1mm×1mm×1mm组织碎片,加入0.1%I型胶原酶消化2-4h；

3）消化液浑浊后终止消化，过200目细胞网筛，1000rpm，5min离心，去上清，沉淀重复离心2次；

4）细胞沉淀种明胶包被的培养皿中，隔天换液；

【培养】

上皮细胞专用培养液

【鉴定】

1）免疫荧光：

阳性：CK18